การเก็บรักษา RNA
รูปที่ 1 ชนิดของ RNA ในเซลล์
Ribonucleic acid หรือ RNA เป็นสารพันธุกรรมของสิ่งมีชีวิตที่ประกอบด้วยนิวคลีโอเบส (A, G, C, และU), น้ำตาลไรโบส และหมู่ฟอสเฟต โดย RNA มีหน้าที่สำคัญในเซลล์โดยการเร่งปฏิกิริยาทางชีวภาพ ควบคุมการแสดงออกของยีน หรือสื่อสารการตอบสนองต่อสัญญาณของเซลล์ รวมถึงการสังเคราะห์โปรตีนโดยใช้ mRNA ดังนั้นแล้วการใช้ RNA ในการศึกษาวิจัยเกี่ยวกับสิ่งมีชีวิตจึงเป็นสิ่งที่น่าสนใจและให้ข้อมูลในเชิงลึกได้ดี แต่ทั้งนี้การใช้ RNA มีจุดอ่อนคือ การที่ RNA เป็นสารพันธุกรรมสายเดี่ยวที่ถูกย่อยสลายได้ง่าย ดังนั้นแล้วการเก็บรักษา RNA หลังทำบริสุทธิ์แล้ว หรือเป็นตัวอย่างสำหรับใช้ในการสกัดจึงสำคัญมาก ซึ่งสามารถเก็บรักษาได้ดังนี้
-
สำหรับ Purified RNA หรือ RNA หลังทำบริสุทธิ์แล้ว
-
เก็บในรูปสารละลายได้ดังตาราง
-
สารละลาย |
อุณหภูมิ (องศาเซลเซียส) |
ระยะเวลา |
0.1mM EDTA in RNase free water |
-80 |
1 ปี |
TE buffer (10 mM Tris, 0.1mM EDTA) |
-80 |
1 ปี |
50% Formamide |
-20 |
1 ปี |
Absolute Ethanol |
-20 |
มากกว่า 1 ปี |
1 mM sodium citrate (pH 6.5), 0.1mM EDTA in RNase free water |
-80 |
มากกว่า 1 ปี |
ในรูปสารละลายได้ดังตาราง
-
-
เก็บแบบ pellet ที่อุณหภูมิ -80 องศาเซลเซียส ได้มากกว่า 1 ปี
-
ทำการแปลงเป็น cDNA และเก็บที่ อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียส ได้มากกว่า 1 ปี
-
ทั้งนี้ห้ามเก็บใน DEPC water เนื่องจาก DEPC อาจจะส่งผลต่อการนำ RNA ไปใช้ในปฏิกิริยาต่อไป
-
สำหรับการเก็บตัวอย่างเพื่อนำมาสกัด RNA
-
เก็บรักษาในสารละลายไนโตรเจน (-196 องศาเซลเซียส) ได้มากกว่า 1 ปี
-
เก็บรักษาที่อุณหภูมิ -80 องศาเซลเซียส ได้ 1 ปี replica Rolex
-
ทั้งนี้ปัจจุบันมีสารละลายที่ทำหน้าที่เป็น RNA stabilizer ในการช่วยเก็บรักษาตัวอย่างดังตาราง
ชนิดตัวอย่าง |
RNA stabilization |
อุณหภูมิและระยะเวลาในการเก็บ |
Human blood |
PAXgene Blood RNA Tubes cat. no. 762165 |
3 วัน ที่ 15–25°C 5 สัปดาห์ ที่ 2–8°C 11 ปี ที่ –20 ถึง –80°C |
Human tissue |
PAXgene Tissue STABILIZER Concentrate cat. no. 765512 |
7 วัน ที่ 15–25°C 4 สัปดาห์ ที่ 2–8°C มากกว่า 1 ปี ที่ –20 ถึง –80°C |
Human bone marrow |
PAXgene Bone Marrow RNA Tubes cat. no. 764114 |
3 วัน ที่ 15–25°C 5 สัปดาห์ ที่ 2–8°C มากกว่า 1 ปี ที่ –20 ถึง –80°C |
Animal blood |
RNAprotect Animal Blood Tubes cat. no. 76554 |
48 ชั่วโมง ที่ 15–25°C 2 สัปดาห์ที่ 2–8°C 3 เดือน ที่ –20 ถึง –80°C |
Saliva |
RNAprotect® Cell Reagent cat. no. 76526 |
14 วัน ที่ 15–25°C 4 สัปดาห์ ที่ 2–8°C มากกว่า 1 ปี ที่ –20 ถึง –80°C |
Tissue |
RNAlater RNA Stabilization Reagent RNAlater TissueProtect Tubes Allprotect Tissue Reagent |
Allprotect-stabilized 7 วัน ที่ 15–25°C 1 ปี ที่ 2–8°C มากกว่า 1 ปี ที่ –20 ถึง –80°C RNAlater-stabilized 7 วัน ที่ 15–25°C 4 สัปดาห์ ที่ 2–8°C มากกว่า 1 ปี ที่ –20 ถึง –80°C |
Bacteria |
RNAprotect Bacteria Reagent cat. no. 76506 |
3 ชั่วโมง ที่ 15–25°C 2 สัปดาห์ ที่ –20°C 4 สัปดาห์ ที่ –70°C |
Cell line, Yeast, Virus |
RNAprotect® Cell Reagent cat. no. 76526 |
7 วัน ที่ 15–25°C 4 สัปดาห์ ที่ 2–8°C มากกว่า 1 ปี ที่ –20 ถึง –80°C |
สนใจสอบถามข้อมูลได้ที่
https://www.qiagen.com/us/applications/molecular-biology-research/rna-resource-center หรือแผนก Technical Support E-mail: techsupport@biodesign.co.th หรือ Info@biodesign.co.th
หรือ Line: @BioDesign หรือ https://www.facebook.com/BioDesignTH
“บทความผลิตภัณฑ์โดย Technical Support Team ”